Isolamento, caracterização de locos microssatélites e variabilidade genética em Anopheles albitarsis sensu lato (Diptera: Culicidae), de duas populações do Amazonas e uma de São Paulo / Giselle Moura Guimarães Marques.

Dissertação (mestre) - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA, 2012

O complexo Anopheles albitasis inclui seis espécies: Anopheles albitarsis sensu stricto, Anopheles marajoara, Anopheles deaneorum, Anopheles janconnae, Anopheles oryzalimnetes e Anopheles albitarsis F. As espécies do complexo A. albitarsis transmissoras da malária no Brasil são: A. marajoara nos Estados de São Paulo, Pará e Amapá; A. janconnae no Estado de Roraima e A. deaneorum no Estado de Rondônia. Marcadores microssatélites têm sido úteis em estudos populacionais de diversos mosquitos de importância epidemiológica. Isolar, caracterizar locos microssatélites para analisar a estrutura genética de A. albitarsis s.l. de duas populações do Estado do Amazonas e uma do Estado de São Paulo foram os objetivos deste estudo. Foram desenhados 34 pares de primers, os quais foram caracterizados em 24 a 36 indivíduos coletados no bairro Puraquequara, Manaus (AM). O número de alelos variou de 2 a 10 com média de 1,98 e com o total de 126 alelos. A heterozigosidade observada (HO) variou de 0,181 a 0,896 e a Heterozigosidade esperada (HE) de 0,255 a 0,854. Onze locos mostraram desvio significativo, para o Equilíbrio de Hardy-Weinberg, e não foi encontrado desequilíbrio de ligação entre os locos. Dentre os 25 locos microssatélites testados, 11 amplificaram com sucesso em outras cinco espécies do subgênero Nyssorhynchus: Anopheles triannulatus, Anopheles braziliensis, Anopheles nuneztovari, Anopheles darlingi e Anopheles oswaldoi. Para estimar a variabilidade e diferenciação genética entre as três populações de A. albitarsis s.l. de Puraquequara, Coari (AM), e Ilha Comprida (SP), selecionaram-se 12 locos polimórficos, e foram obtidos 156 alelos com média de 4,33 alelos, por loco. O número de alelos por loco variou entre dois a nove, com tamanho de 119 a 337 pb. A média da heterozigosidade observada (HO) e a heterozigosidade esperada (HE) foi de 0,532 a 0,586, respectivamente, mostrando variabilidade nessas populações. As estatísticas F de Wright revelaram uma estruturação genética moderada entre as três populações (FST = 0,143) com diferenciação genética intermediária entre Puraquequara e Coari, e uma alta diferenciação genética entre estas duas últimas localidades e Ilha Comprida (FST = 0,191 e 0,189). A distância genética entre as três populações variou de 0,102 a 0,191, indicando que as do Amazonas (Puraquequara e Coari) são mais próximas entre si do que estas com a de São Paulo (Ilha Comprida). A análise Bayesiana por meio do programa STRUCTURE, mostrou três clusters (K = 3), indicando três populações distintas. Estes dados auxiliarão no estudo da estruturação genética, evolução, e juntamente com outros marcadores genéticos, para a compreensão do status taxonômico do complexo A. albitarsis s.l., envolvido na transmissão primária de espécies do gênero Plasmodium da malária no Brasil.

Área de concentração : Genética, Conservação e Biologia Evolutiva