Expressão em Escherichia coli de quitinase (E.C. 3.2.1.14) de Chromobacterium violaceum / Márcia Neiva.
Detalhes da publicação: Manaus 2005Notas: x, 85 f. : ilAssunto(s): Escherichia coli | Quitinase | Microorganismos -- Genética | Chromobacterium violaceumClassificação Decimal de Dewey: 576.139 Nota de dissertação: Dissertação (mestre) - INPA/UFAM, 2005 Sumário: A conclusão do seqüenciamento do genoma de Chromobacterium violaceum deu origem à necessidade de caracterizar a funcionalidade dos genes anotados presentes no cromossomo dessa bactéria. Em seu genoma foram encontradas várias ORFs (Open Reading Frames), correspondentes a genes de interesse biotecnológico, e entre eles cinco que codificam quitinases. Esse trabalho apresenta os resultados da clonagem e expressão dos genes que codificam quitinases de Chromobacterium violaceum. Foram selecionadas quatro ORFs cujas seqüências de DNA foram obtidas por meio de PCR, com iniciadores específicos. Foram utilizadas duas estratégias neste trabalho, a clonagem da seqüência completa dos genes, e outra a clonagem da região codificadora fusionada com a seqüência da subunidade B da proteína A de Staphylococcus aureus, utilizando sinais de transcrigção e tradução de um vetor de expressão conhecido. A primeira estratégia não produziu resultados conclusivos, pois não se obteve sucesso na clonagem. Com a segunda estratégia foi obtida expressão da seqüência correspondente a ORF CV2736 , cuja proteína foi expressa em altos níveis e apresentou atividade frente ao substrato.| Tipo de material | Biblioteca atual | Setor | Classificação | Situação | Previsão de devolução | Código de barras |
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Livro
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Dissertação | T 576.139 N417e (Percorrer estante(Abre abaixo)) | Disponível | 05-0564 |
Dissertação (mestre) - INPA/UFAM, 2005
A conclusão do seqüenciamento do genoma de Chromobacterium violaceum deu origem à necessidade de caracterizar a funcionalidade dos genes anotados presentes no cromossomo dessa bactéria. Em seu genoma foram encontradas várias ORFs (Open Reading Frames), correspondentes a genes de interesse biotecnológico, e entre eles cinco que codificam quitinases. Esse trabalho apresenta os resultados da clonagem e expressão dos genes que codificam quitinases de Chromobacterium violaceum. Foram selecionadas quatro ORFs cujas seqüências de DNA foram obtidas por meio de PCR, com iniciadores específicos. Foram utilizadas duas estratégias neste trabalho, a clonagem da seqüência completa dos genes, e outra a clonagem da região codificadora fusionada com a seqüência da subunidade B da proteína A de Staphylococcus aureus, utilizando sinais de transcrigção e tradução de um vetor de expressão conhecido. A primeira estratégia não produziu resultados conclusivos, pois não se obteve sucesso na clonagem. Com a segunda estratégia foi obtida expressão da seqüência correspondente a ORF CV2736 , cuja proteína foi expressa em altos níveis e apresentou atividade frente ao substrato.
ãrea de concentração: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva.
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