TY  - BOOK
AU  - Neiva,Márcia
AU  - Andrade,Edmar Vaz de
TI  - Expressão em Escherichia coli de quitinase (E.C. 3.2.1.14) de Chromobacterium violaceum
U1  - 576.139 19
PY  - 2005///
CY  - Manaus
KW  - Escherichia coli
KW  - Quitinase
KW  - Microorganismos
KW  - Genética
KW  - Chromobacterium violaceum
N1  - Dissertação
N2  - A conclusão do seqüenciamento do genoma de Chromobacterium violaceum deu origem à necessidade de caracterizar a funcionalidade dos genes anotados presentes no cromossomo dessa bactéria. Em seu genoma foram encontradas várias ORFs (Open Reading Frames), correspondentes a genes de interesse biotecnológico, e entre eles cinco que codificam quitinases. Esse trabalho apresenta os resultados da clonagem e expressão dos genes que codificam quitinases de Chromobacterium violaceum. Foram selecionadas quatro ORFs cujas seqüências de DNA foram obtidas por meio de PCR, com iniciadores específicos. Foram utilizadas duas estratégias neste trabalho, a clonagem da seqüência completa dos genes, e outra a clonagem da região codificadora fusionada com a seqüência da subunidade B da proteína A de Staphylococcus aureus, utilizando sinais de transcrigção e tradução de um vetor de expressão conhecido. A primeira estratégia não produziu resultados conclusivos, pois não se obteve sucesso na clonagem. Com a segunda estratégia foi obtida expressão da seqüência correspondente a ORF CV2736 , cuja proteína foi expressa em altos níveis e apresentou atividade frente ao substrato
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