Caracterização molecular da dieta do morcego hematófago Desmodus rotundus (Mammalia: Chiroptera) na Amazônia brasileira / Paulo Estefano Dineli Bobrowiec.

Tese (doutor) - INPA/UFAM, 2007

Métodos tradicionais de identificação de itens da dieta de vertebrados, por meio da análise visual das fezes, não são eficientes em estudos sobre a ecologia alimentar de morcegos hematófagos, devido ao fato da ingestão de sangue produzir fezes constituídas somente por partes moles. Assim, a utilização de métodos moleculares com base no isolamento e amplificação do DNA oriundo de amostras fecais constitui uma importante ferramenta para o conhecimento da dieta de animais predadores como os morcegos hematófagos. No presente estudo foi desenvolvido um método molecular com base na técnica PCR-RFLP, a partir da análise do DNA isolado de fezes do morcego hematófago Desmodus rotundus, o qual mostrou-se eficaz na identificação das cinco espécies de presas (galinha, boi, porco, humano e cachorro) mais atacadas por este morcego em comunidades ribeirinhas rurais na Amazônia brasileira. Um experimento foi conduzido com indivíduos de D. rotundus mantidos em cativeiro para a coleta de amostras fecais, após alimentação dos mesmos com sangue das cinco espécies de presas analisadas. O DNA genômico total foi extraído com sucesso das amostras fecais coletas, bem como de amostras de sangue das presas, as quais serviram como controle no experimento. Foram utilizados primers universais para amplificar, via PCR, uma região do gene citocromo b (380 pb) a partir do DNA isolado das fezes dos morcegos e do sangue das presas. Em seguida os produtos da PCR foram clivados utilizando cinco enzimas de restrição (Hae m, Rsa I, Taq I, Bmg Bl, Xho I) selecionadas de modo a gerar fragmentos distintos ao nível de espécie. Os padrSes de restrição observados após a clivagem apresentaram total similaridade entre os tratamentos que utilizaram amostras de sangue e de fezes. A análise PCR-RFLP possibilitou diferenciar de forma inequívoca, as cinco espécies de presas utilizadas por D. rotundus na Amazônia brasileira. Este estudo é pioneiro no desenvolvimento de um método para identificação precisa de espécies de presas utilizadas na dieta de morcegos hematófagos. A partir do desenvolvimento deste método molecular foi analisada a frequência de consumo de cada uma destas presas por morcegos hematófagos em condiçSes de campo. Foram amostradas 18 comunidades ribeirinhas dos rios Madeira e Aripuanã e do lago Ayapuá, no rio Purus, onde os morcegos foram capturados e suas amostras fecais coletadas. e analisadas por PCR=RFLP conforme previamente descrito. Os produtos de amplificação não identificados pela técnica PCR-RFLP foram sequenciados e comparados com o banco de dados de vertebrados.

Orientação: Gribel, Rogério

Co-orientação: Lemes, Maristerra Rodrigues

ãrea de Concentração: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva