Influência dos contaminantes ambientais Benzo[a]pireno e Roundup® sobre Colossoma macropomum submetida à hipóxia e mudanças climáticas: respostas genéticas, fisiológicas e histológicas / Grazyelle Sebrenski da Silva

Tese (Doutor) - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA, 2016.

Esse estudo objetivou compreender os efeitos (genéticos, histológicos e fisiológicos) de diferentes estressores ambientais como: temperatura, níveis de CO2 e O2, bem como a ação dos contaminantes benzo[a]pireno (BaP) e Roundup® (RD) em Colossoma macropomum. No primeiro capítulo foi avaliado o efeito agudo (96 h) do BaP (4, 8, 16, 32 mol/kg) em tambaquis. Foram observadas alterações no nível de expressão do oncogene ras e do fator de indução à hipóxia-1 (hif-1). Os danos teciduais no fígado aumentaram nos peixes expostos ao BaP (8, 16, 32 mol/kg) quando comparados com o controle, sendo classificados como danos irreparáveis. Verificou-se também o aumento no índice de danos genéticos das células sanguíneas por meio do ensaio cometa. O segundo capítulo descreve os efeitos do BaP (8 e 16mol/kg) em tambaquis expostos ao cenário climático A2 (cenário extremo) que prevê um aumento médio de 4.5 °C na temperatura do ar e 850 ppm de CO2, como proposto pelo IPCC (2007). O aumento da temperatura e dos níveis de CO2 no cenário extremo induziu modificações nos níveis de expressão do oncogene ras e do gene hif-1. Tanto o oncogene ras como hif-1. apresentaram aumento nos níveis de expressão nos peixes injetados com ambas as concentrações de BaP e expostos ao cenário extremo, quando comparados aos mesmos tratamentos no cenário atual. Por outro lado, as respostas das enzimas glutationa-S-transferase (GST) e catalase (CAT) e nível de lipoperoxidação (LPO) foram maiores no cenário controle. A atividade da GST e CAT diminuiu nos peixes expostos ao BaP no cenário extremo, em relação ao cenário controle, mostrando que um possível cenário com altas temperaturas e níveis de CO2 enfraqueceriam as respostas antioxidantes do organismo. Da mesma maneira, os níveis de LPO diminuíram. Em consequência da falha no sistema antioxidante, o cenário extremo teve maior influência sobre as variáveis genéticas aumentando a expressão do oncogene ras e hif-1, bem como os danos no DNA a alterações histológicas, causando danos irreversíveis nas células hepáticas e necrose do tecido. No terceiro capítulo foram avaliadas as repostas toxicológicas de C. macropomum expostos simultaneamente ao RD e hipóxia. Surpreendentemente, os animais expostos à hipóxia e à hipóxia mais RD tiveram seus níveis de expressão de hif-1 menores doque aqueles submetidos à normóxia e normóxia mais RD, sugerindo uma lesão celular maior nesses grupos. O oncogene ras apresentou expressão relativa maior nos animais contaminados com RD em normóxia, diminuindo sua expressão relativa nos animais expostos à hipóxia e RD, o que também pôde ser explicado pelas lesões celulares (vide abaixo). As enzimas de estresse oxidativo GST e CAT apresentaram maior atividade em ambos os tratamentos sob hipóxia, sendo capazes de minimizar os danos de estresse oxidativo nas membranas, o que foi evidenciado pela baixa taxa de lipoperoxidação (LPO). As alterações histológicas do fígado de C. macropomum expostos à normóxia mais RD, hipóxia e hipóxia mais RD foram similares, sendo que os peixes tiveram massiva ocorrência de necrose. O tambaqui se mostrou um excelente modelo para os estudos de genes relacionados ao câncer, complementado pelos marcadores moleculares como o oncogene ras e o gene hif-1